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La Divisione Nazionale 1940-41 fu il 13º campionato nazionale italiano di rugby a 15 di prima divisione.
Si tenne dal 24 novembre 1940 al 23 marzo 1941 tra 13 squadre e, dopo quattro stagioni consecutive di girone unico, tornò alla formula a gironi separati, uno di 7 squadre e un altro di 6; le prime due classificate di ogni girone disputarono la semifinale, in gara unica in casa della seconda classificata.
Fu prevista anche una finale per il 3º posto e le gare di assegnazione del titolo si disputarono a Busto Arsizio[1].
L'Amatori Milano si aggiudicò il suo 11º titolo, quarto consecutivo, battendo in finale il GUF Torino per 6-0[2]; nella finale del terzo posto il GUF Milano batté per 9-0 i colleghi universitari di Bologna[2].